ия. Сначала образуется инициаторный комплекс путем присоединения белковых факторов, формилметионил-тРНК и ГТФ к 30S субчастице, к которой комплементарно антикодону формилметионил-тРНК присоединяется мРНК при участии кодона ЛУГ (рие_ 14.5).

( лсдует указа j ь па особую роль формнлме шопнл i PI I К: она помогает мРНК наЙТИ на 30S субчастнце определенное местоположение, обе сие чивающее точную трансляцию информации о последовательности аминокислот в полипептидной цепи (установление рамки). Как только мРНК присоеттдняется к комплексу, высвобождается белковый фактор IF 3 и оставпптйся комплекс легко присоединяет 50S субчастицу, образуя транслирующую, т.е. функционально активную, 70S рибосому. В процессе этих пе|)еетроск рибосомы освобождают остальные белковые факторы инициации и продукты гидролиза 1 ГФ (1ДФ и неорганический фосфат), энергия которого расходуется, по-видимому, на формирование инициирующего 70S комплекса рибосомы. В этом комплексе формилметионил-тРНК оказывается прикрепленной к пептидилсвязывающему центру рибосомы. В гадролизе ГТФ принимает участие ТГ 2. У образовавшейся активной, полностью сформировавшейся 70S рибосомы, содержащей формилметио-нил-тРНК, оказывается свобод!и>1м амипоацнльпын центр, который может

реагировать с определенной аа-тРНК, соответствующей очередному кодону мРПК С пою момента начинается И паи енптеча белка члопгацпя,

'Глотании фшнмнщии. Процесс члопгации полппептпдпоп цепи у I1,, coli начинается с образования nepBofi пептидной связи н непосредствен по, точнее топографически, связан с большой субчастицей (50Й) рибосомы, содержащей два центра для связывания тРНК: один из них называется амин о ац ильным (А), другой—пептид ильным (П) (рис. 14.6).

В процессе элонгации у R coli также участвует три белковых фактора -члопгацпоппые факторы трансляции, сокращенно обозначаемые I и, Т.ч п (i (см, табл. 14,1): II Тп (мол, масса 43000), 1.1" Is (мол. масса 3S000) п IT О (мол. масса КОООО), У чукарнот также открыты три таких фактора, названных эукариотиче скими элонгационными факторами трансляции и обозначаемых соответственно eEF-la (мол масса 53000), eEF-lap (мол. масса 30000) и eEF-2; почти все они получены в чистом виде, для ряда из них установлена первичная структура.

Процесс члопгации принято делить на 3 стадии: учи а ванне к од она п связывание амппоацил тРНК, образование пептц.цюй связи п трапело кация. Па 1 стадии в соответствии с природой кодона мРНК в свободны!! А-участок рибосомы доставляется амгшоацил-тРНК при участии фактора элонгации Ти. Этот процесс требует затраты энергии и сопряжен с гидролизом ГТФ и образованием прочно связанного комплекса Тп—ГТФ. Образовавшийся комплекс подвергается диссоциации только в присутствии второго фактора элонгации Ts, при котором освободившийся фактор Тп может ВНОВЬ, соединяясь С молекулой ГТФ, принять участие в доставке аа-тРНК в рибосому. Таким образом, в транслирующей 70S рибосоме в пеггтидильном центре располагается формилметионил-тРНК, а в А-центре - аминоацил-тРНК (первая амтшокислота после метионина). С этого момента ттачтптастся ТТ стадия ялотттацтпт образование первой пепттгтпой связи. Для чтого в рибосоме осуществляется (]>ерменга'пшпая реакция трапепептид ирования между формпл мет попил 11*11К в П-центре и повой аа тГПК в А центре. В ттроцессе л он реа1щшт остаток формтглме шошша переносится на свободную NH2-rpynny аа-тРНК и замыкается первая пептидная связь в будущей полипептидной цепи. Параллельно из пеп-тидильного центра освобождается тРНК*м™ в цитозоль. Фермент, катал и чиру ющи и реакцию трапепептнроваппя, получил название пепгндил трапеферазы (рис. 14.7); он, вероятнее всего, является составной частью белков S0S еубчастпцы. Таким образом, в процессе гранепентпдазпой реакции в А-центре образуется дипептидил-тРНК, а 11-центр остается свободным («вакантным»).

На III стадии процесса элонгации необходимо иметь свободный аминодаря процессу транслокации образовавитжйся фрагмент- дппептидил тРНК

TTprvatT^r< рГГГЧГ ОТ Я М"ИТГП Я1ГИ ПТ.НОГО ?ТЯ ТТРТТТИ ГГИ'ПТчНТчТЙ llf'NTO HJ ГН 'III Г-,) t'l'i чг

Рис 147. Перенос фМет-тРНК между двумя центрами (П и А) на большой 50S субчастице рибосомы.

транслокация благодаря шредаижению рибосомы относительно мРНК при участии фермента транслоказы (функцию ее выполняет фактор элонгации G у Е. соИ и eEF-2 у эукариот) за счет использования энергии распада еще одной молекулы ГТФ. В результате транслокации дипептидил-тРН К занимает место в пептщдильном центре рибосомы, а аминоацильный центр освобождается для нового цикла узнавания и может присоединить новую следующую аа-тРНК, соответствующую кодону мРНК. В процессе транслокации рибосома перемещается вдоль мРНК по направлению к ее 3'-концу на расстояние в один кодон, т.е. точно на один триплет. На рис. 14.8 видно, что рибосома вступает в следующий цикл - происходит присоединение третьего аминокислотного остатка и т.д.

Таким образом, на стадии элонгации происходит последовательное наращивание полипегаидной цепи по одн