иации синтеза белка, другая дли включения метионина во внутреннюю структуру синтезируемого полипептида в стадии элонгации (см. далее). Соответственно эти тРНК принято обозначать тРНКфМет и тРНК Укажем также, что эукариотичеекая клетка не нуждается в формилировании метионина.

АТФ АМФ + PR

У прокариот синтез N формшшетаонил-тРНК протекает в две стадии:

(...' I • - CHG

М&ТИОНИЛ-ТРНК-С.ИШМПЧП

CHj» +? ТРНН*'М

О—тРНН'

Метионил-тРНЮ*м"

;' -1 N -СООН Метионин

Данную стадию катализирует мехисвил-тРНК-синтетаза. Реакция n-i-дается в доставке оперши щпролиза АТФ.

Н10-СНО-ТГФК ДГФК 1

'I f\J —p— , й ^iiiU) „I"'

1 1 - TPILL|F.tj*'|'Ml1Jlli«SI ' ? -.

I п О H

Метаонил-тРНК*"" Ы-фо^^^щоиилЕатализирующая ll струит трансформилаза оказалась более специ-фичной, чем метионил тРНК-синтетаза: она не формилирует нж свободами

метионин, им метионин и комплексе с тРНКм"

Таким образом, N-формилметионил-тРНК является первой аа-тРНК, которая определяет включение N-концевого остатка аминокислоты и тем самым начало трансляции. Процесс форматирования имеет важный химический и биологи11 е ек м ti с м i >i CJ пол окируя участие NTT ггрут) м i >i метионина в образовании пептидной связи, он обеспечивает тем самым синтез белка в направлении N11 (ООП; образовавшаяся формилметионил-тРНК, кроме того, первой связывается с определенным участком 30S субчастгагы рибосомы и с мРНК.

Необходимым условием инициации, как было отмечено, является также наличие инициирующих кодонов, кодирующих формилметионин. У бактерии чту функцию выполняют триплеты ЛУГ и IVI мРНК. Однако они кодируют формил мет ноши I (или начальным мет HOI шп и эукариотической клетке) только будучи начальными триплетами при считывании мРНК. Если эти триплеты являются обычными, т.е. внутренними, то каждый из них кодирует свою аминокислоту: в частности, АУГ кодирует метионин, а ГУТ—валин. Ясно, что начальный, инициаторный 5"-АУГ-кодон должен чем-то отличаться от других ДУГ кодонов, возможно, структурой окружения Триплета. Предполагают, что ншщиаторНОМу 5" ЛУГ КОДОНУ у прокариот предшествует сигнальная 11олнггуриновая (порядка от 8 до 13 оснований) пешледовательпость (Shine Dalgarno sequence), которая узнается полипиримидиновой 3"-антипараллельной последовательностью в молекуле 16S рРНК 30S субчастицы. Допускается, кроме того, существование определенных различий во вторичной структуре мРНК в участке ини-цтпгруюшето кодотта, еттособствуюптттх его узнаватппо.

К настоящему времени выяснена природа белковых факторов инициации. У 1 coli (см. табл. 14.1) открыты три таких инициирующих фак тора, обозначаемых соответственно lF-i, 1F-2, 1Г-3. Все они. получены в высокеючищенном состоянии с примерными молекулярными массами 9000, 10000 и 22000 соответственно. IF-3 обеспечивает узнавание участка на молекуле мРНК, к которому присоединяется формилметионил-тРНК. Данный белковый (фактор первым связывается со свободной 30S суб частицей рибосом]>1 и препятствует ассоциации 30S и 50S субчастнц в 70S рибосому без молекулы мР11К. 1Г' I способствует связыванию инициатор ной формилметионил-тРНК с комплексом 30S субчастицы и мРНК. Белковый фактор IF-2, вероятнее всего, способствует объединению 30S и 50S субчастиц после того, как на первой субчастице уже присутствуют инициирующие кодоны мРНК, N формилметионил-тРНК, ТГ 3, ТГ 1 и ГТФ. Этот бедок рассматривает как фактор стабилизации всего ш ищи игорного 70S комплекса (см. далее).

фМет-тРНК

мРНК I

Антикодон —

SOS

Рве. 14,5. Схематическое изображение к ^шмолеЛетшя <|и>рм ипметионил-тРНК и

мРНКс ЗШ субчастицей рибосомы (а) н чрпклпруннцел (функционально активной) 70S рибосомой (б).

Аналогичные белковые факторы инициации обнаружены также в эука-риотических клетках. Открыто около 10 эукари отиче ских белковых факторов Ml I и I in :i i in и (см. табл. 14.1), их принято обозначать еТГ. Все они, по-видимому, важны для инициации, однако только три in них абсолютно необходимы н существенны для белкового синтеза: ell' 2, ell1' Я и ell1' S. Они получены в чистом виде: ell-2 состоит из а-, (3- и у-суОъединиц (MOJL масса 38000, 47000 и 50000 соответственно), eIF-З (мол. масса 500000-700000) и eIF-5 (мол. масса 125000). Укажем также, что в синтезе белка их роль тождественна роли инициаторных белков у прокариот. Отличительной особенностью синтеза белка у эукариот является» кроме того, наличие среди К) белковых факторов irmrmrairrai еще одного белка, названного кэп-связы-ваюнщм. Соединяясь с S' участком кэп мРНК, этот белок содействует образованию комплекса между мРНК и 40S рибосомной субчастицей. Необходимо отметить, что до сих пор не раскрыты тонкие молекулярные механизмы участия белковых факторов инициации как у про-, так и у эукариот в сложном процессе стпттеза белка.

I) б р а з о в а 1111 е и ним и а г о р 11 о г о к о м н л е к с а. V)KCI icpi i меч палы i о до казано, что в процессе белкового синтеза наблюдаются постоянная дне социация 70S рибосом на 30S и SOS еубчаетнцы п последующая их реассоциац