ду и полученную пасту сушат до влажности 2% и размельчают.

Порошок дрожжей при температуре 78°С в экстракторе обрабатывают трехкратным объемом спирта-ректификата.

После отделения раствора осадок еще раз экстрагируют спиртом, из экстракта в вакуум-аппарате отделяют спирт, а остаток фильтрата сгущают до 70%-ного содержания сухих веществ. Из 100 кг дрожжей получают 20—25 кг липидного концентрата.

181

Полученный концентрат липидов омыляют 45% раствором NaOH из расчета 6 кг раствора щелочи на 100 кг дрожжей. После омыления раствор эргостерина кристаллизуют при 0°С. После фильтрации первый осадок кристаллов повторно кристаллизуют.

Сырец далее обрабатывают 69% спиртом из расчета 10 кг спирта на 1 кг сырца эргостерина, а затем обрабатывают смесью спирта и бензола (80:20). После отгонки раствори-j теля и сгущения эргостерин еще раз кристаллизуют, получен-1 ные кристаллы сушат.

Дрожжевую массу после экстракции эргостерина сушат и используют в животноводстве.

Чтобы получить витамин D2, сухой эргостерин растворяют в эфире. Раствор непрерывным потоком протекает через облуча-' тель в дистиллятор, где происходит отгонка эфира и концентрирование раствора. Раствор витамина D2 фильтруют и после стандартизации его спиртом или маслом используют как концентрат витамина D2.

Для получения кристаллического витамина D2 облученный раствор эргостерина концентрируют и кристаллизуют.

Кристаллы витамина D2 белого цвета, температура плавления ИЗ—114°С.

Каротиноиды

Каротиноидами называют встречающиеся в клетках расте-; ний и микроорганизмов желто-оранжевые пигменты, часть кото: j рых биологически активна. По химическому строению это no-j лиены, молекулы которых содержат до 40 атомов углерода: ] Если в молекуле каротиноидов содержатся только углерод и во- < дород, то их называют каротинами, а если в молекуле содержится и кислород — то их называют ксантофилами.

Каротиноиды имеют циклическое (а, р, у-каротины) или!

ациклическое (л^копин) строение. '

Биологически наиболее активным является провитамин витамина А — р-каротин, в молекуле которого содержится два \ кольца р-иокона

СН, сн3

СНа СНз СНз СН, СНз СН.1

il I I ^сС ,

н2с- Ч-сн=снс=снсн=снс=снсн=снсн=с№снсн-с№сн-с CHJ

и]- г—си НдС-С^ ^CHJ

*-н2 р-каротин

Образование каротиноидов в культуре микроорганизмов не идет параллельно с образованием биомассы (рис. 61). Когда в среде использован весь азот, а рост клеток уменьшается, тогда в биомассе начинают накапливаться липиды и каротиноиды.

При образовании каротинов пигменты сменяют друг друга путем постепенной дегидрогенизации. Установлено, что у дрожжей Rhodotorula вначале образуется фитоин, который через фитофлуин и ряд других каротиноидов превращается в -у-каротин, который считают предшественником р-каротина. В ходе дальнейшего развития из р-каротина .может образоваться торулин, а из него торулародин.

Каротиноиды содержат клетки многих бактерий (микобакте-рии, микрококки), дрожжей (Rhodotorula, Sporoholomyces), плесневых грибов (Blakeslea trispora). Особенно богата р-каротином биомасса Bl. trispora, содержащая до рис. 10—50 мг р-каротина на 1 г биомассы.

Эта культура образует (+) — и (—) —формы (гетероталлизм). Посевной материал для каждой формы готовят отдельно, а основную ферментацию ведут в одном аппарате. Для выращивания используют как метод поверхностной, так и глубинной культуры.

При работе методом глубинного культивирования среду готовят на доступных источниках углерода (углеводы, кислоты), часто из мелассных или зерновых заторов, концентрация которых составляет в среде 7—8%.

Как источник азота можно использовать минеральные соли или органические вещества. Кроме того, к среде добавляют 4— 5% растительного масла богатого олеиновой и линоленовой кислотами, а также около 0,1% р-ионона.

Выращивание посевного материала длится 48 часов, основная ферментация — 5—6 сут при температуре 28°С, рН среды 6,2—6,7. Во время ферментации среду интенсивно аэрируют. Интенсивный синтез каротиноидов начинается после использования азота питательной среды. Образование каротиноидов стимулируют не только упомянутые вещества — жирные кислоты и Р-ионон, но и экстракты цитрусовых, помидоров, моркови, дрожжей, а также керосин.

182

183

Во время ферментации желательно добавить в питательную среду поверхностно-активные вещества (0,1%) для предотвращения образования жировых конгломератов.

За время ферментации Blakeslea trispora накапливает 1,0— 1,7 кг В-каротина на каждый кубический метр культуральной жидкости. Это количество [J-каротина равно количеству последнего, полученного в течение года с 1 га посевов моркови.

После ферментации мицелий фильтруют и сушат в вакууме при температуре 50—55°С. Каротин извлекают из сухого размельченного мицелия экстракцией эфиром или растительными маслами.

Для получения кристаллического каротина биомассу в течение 1—1,5 ч обрабатывают в экстракторе четырехкратным объемом бензола. Затем в присутствии углекислоты СОг бензол отгоняют. Полученн