химический каталог




Введение в биотехнологию

Автор М.Е.Бекер

о можно отделить от 5,6-диметилбензими-дазола гидролизом соляной кислотой. Если фактор В связан с 5-оксибензимидазолом, то его называют фактором III, последний также обладает биологической активностью. Если нуклео-тидную часть составляют производные пурина или пиримидина, то образуются неактивные псевдовитамины.

Биосинтез цианкобаламина у микроорганизмов проходит

174

175

2С02

+2CH2NH2COOH ?

СН-СООН

ch2-co-chnh2cooh

СООН

СН2

через несколько этапов. Образование сходного с порфиринами гетероцикла начинается конденсацией глицина с производным образующейся в цикле Кребса янтарной кислоты — сукцинил-коферментом А. Образуется а-амино-р-кетоадипиновая кислота, которая, декарбоксилируясь, образует 6-аминолевулиновую кислоту. При конденсации двух молекул этого соединения образуется производное пиррола — порфобилиноген.

СН2СООН 2 I

НООС I

С На

Crl2_CO-S-KoA

СН2СООН2Н20

СН2 2 СН2 I

NH

CO-CH2NH2

СН2

NH2

па/кроёи/шшен

Из порфобилиногена образуются гетероцнклы витамина Bi2. Донором метильных групп при образовании молекулы витамина Bi2 является метионин.

Для синтеза молекулы витамина Bi2 в питательной среде должен быть кобальт, а также 5, 6-диметилбензимидазол, который некоторые микроорганизмы синтезируют сами.

Для получения медицинского препарата витамина Bj2 широко используют Propionibacterium freudenrei-chii или Pr. shernianii, их выращивают по методу глубинной ферментации, на среде, содержащей 1 % гидролизата казеина, 1% пептона, 1,25% лактата натрия, 0,3% дрожжевого экстракта, соли кобальта и 5,6-диме-тилбензимидазол. В анаэробных условиях ферментация культуры Propionibacterium длится 72 ч при температуре 28—30°С.

176

За это время в культуральной жидкости накапливается 3000— 10 000 мкг/л витамина Bi2 (рис. 59).

Биосинтез витамина В12 может идти и при аэробных условиях, используя актиномицеты, например Actinomyces olivaceus. В этом случае среду готовят из кукурузного экстракта или барды спиртовой промышленности, гидроля, крахмала, глюкозы, сульфата аммония и солей кобальта. Образование активной формы витамина и в этом случае стимулируют добавки 5,6-диметил-бензимидазола.

Для получения кристаллов витамина Bi2 культуральную жидкость центрифугируют и выделяют содержащую витамин клеточную массу. Затем ее гидролизуют и очищают полученный раствор витамина. Очистку витамина В[2 из водных растворов можно провести, обрабатывая раствор:

1) бензиловым спиртом, добавляя к экстракту хлороформ и

экстрагируя витамин водой;

2) гидроокисью цинка;

3) смесью крезола и тетрахлоруглерода (1 : 1);

4) хроматографически, пропуская через колонку с А1203 и

элюируя витамин 50% смесью вода — ацетон.

Очищенный раствор витамина кристаллизуют. Получают темно-фиолетовые кристаллы витамина В|2 с 75—76%-ной степенью чистоты. Выход витамина составляет 67—70%.

Себестоимость витамина, полученного в процессе стерильной ферментации, сравнительно высока, поэтому для нужд животноводства его получают по более простому) методу метанового брожения, используя в качестве сырья отходы пищевой промышленности. Оригинальный метод разработан в Институте биохимии им А. Н. Баха АН СССР.

Работая по этому методу, из долго хранившейся «бродящей» спиртовой барды выделяют смешанную культуру, которая интенсивно утилизирует сухие вещества барды и выделяет метан. Культуру постепенно размножают в инокуляторах в термофильных условиях при температуре 55—57°С и рН 8 на натуральной мелассно-спиртовой барде до 10—20 м3 объема.

В среде необходимо создать анаэробные условия. Для этого через нее продувают углекислый газ или выделяющиеся газы. Нельзя допускать закисания, поэтому барду необходимо часто разбавлять. Процесс идет по полунепрерывной схеме. Каждый день, после того как часть сброженной жидкости отводится из ферментатора для дальнейшей обработки, в бродящую массу вводят свежую среду. Вначале суточный обмен питательной среды невелик — 3—5% от общего объема. Постоянно надо контролировать кислотность среды, которая не должна превышать 0,3—0,6 мл 0,1 н. NaOH на 10 мл среды. Выделение газа постепенно растет, достигая 10—30 ед. объема на единицу объема среды, а содержание витамина от 200—300 мкг/л увеличивается

177

до 1000—2000 мкг/л. Для интенсификации синтеза витамина В12 к среде добавляют СоС12 до концентрации кобальта 4 г/м3, а также I—1,5% метилового или этилового спирта. Когда выделение газа достигает 20—30 ед. объема на единицу объема жидкости, а количество витамина превысит 1000 мкг/л, всю культуральную жидкость перекачивают в метантанки—1000 м3 железобетонные емкости, находящиеся вне здания.

Постепенно, каждый день добавляя 5—10% свежей барды и следя за названными ранее показателями, количество раствора в метантанках доводят до полного рабочего объема. Затем, поддерживая оптимальные для синтеза витамина Bi2 условия, начинают ежедневно отбирать до 10% сброженной жидкости, содержащей 2—4 г/л сухой биомассы (содержание суммарного сухого вещества в жидкости 2—3%). Количество витамина Bi2 должно дос

страница 61
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81

Скачать книгу "Введение в биотехнологию" (2.32Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
вентилятор vp60-30/28.4d технические характеристики
купить наклейки лада самара
купить овальный обеденный стол в интернет магазине
ленком официальный сайт афиша цены

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(19.08.2017)