цито-золе.

В растениях амидгидролазы встречаются в покоящихся и прорастающих семенах, а также в листьях, стеблях, корнях и плодах.

Многие протеолитические ферменты (пептидазы и протеиназы), особенно у животных, продуцируются клеткой в виде неактивных предшественников - зимо-генов. Превращение зимогена в активный фермент (активация) происходит непосредственно в том месте организма, где необходимо его участие в химических превращениях метаболитов (см. гл.5).

2.3. Характеристика отдельных типов амидгидролаз

Описанию амидгидролаз посвящены многочисленные обзоры (например: И 78-183]), освещающие различные аспекты исследований этого класса ферментов. В каждой из четырех групп амидгидролаз трудно выделить что-то общее по источникам получения, специфичности, т.е. способности катализировать гидролиз амидных связей в эндо- или экзоположениях полипептидной цепи, а также по величинам молекулярной массы, наличию или отсутствию субъединиц. Можно лишь отметить, что среди аспартатных амидгидролаз практически отсутствуют экзо-пептидазы. Аспартатные амидгидролазы не найдены у прокариот. В то же время экзопептидазы наиболее часто представлены металлсодержащими амидгидролаза-ми. Эта последняя группа ферментов отсутствует среди вирусных протеиназ.

Общие признаки, характеризующие отдельные группы ферментов, заключаются в следующем: все сериновые амидгидролазы чувствительны к специфическим ингибиторам, взаимодействующим с каталитически активным остатком серина, -диизопропилфторфосфату (ДИФ), фенилметилсульфонилфториду (ФМСФ) и некоторым ингибиторам микробного, животного и растительного происхождения. Эти ингибиторы подавляют их каталитическую активность. Следует отметить, что существуют количественные различия в действии тех или иных ингибиторов на разные ферменты этой группы. Так, скорость и степень подавления активности (инги-бирования) ДИФ разных амидгидролаз может быть различной. Многие сериновые амидгидролазы, чувствительные к ДИФ, не подавляются ФМСФ. Заведомо, серию-

Таблица 12. Амидгидролазы

Литера-турный источ-

N п/п

Номер го КФ

Название фермента

Источник

кДа

Данные о структуре"

Примечание

Сериновые амидгидролазы

6 7 8 9 10 11

12 13

14 15

16 17

18

19 20

21

22 23

24

3.4.14.2

.4.14.4 .4.14.5

.4.14.8 .4.16.1

Дипептидил-пептидаза II То же

Дипептидил-пептидаза III То же

Дипептидил-пептидаза IV То же

Трипептидил-пептидаза I

То же II Сериновая карбоксипеп-тидаза То же

Гипофиз быка Эпидидимис хряка Хепорио laevia Sacharomyoeo cerevloiae

Flavobacterium meningo-

oeptiouM Хрусталик человека Мозг крыс

Фибробласты человека Почки свиньи Почки ягненка Разные органы крыс

Печень свиньи Яичники свиньи

Печень, эритроциты Лизосомы печени крыс A,S

То же Зерна ячменя

То же

и

Зерна пшеницы

То же Бобы

Цитрусовые То же

A,L

II

III II

Ua

SacharoKiyces oereviaiae

130 110 98 40

160

80 80 400 280 230 190--266 360 55

135 100

400

60

60 48 55

126 120 93

96 59

(2«54),гл. гл. 1Ц.

(2«75)

1ц. Щ.

2ц. (125,135) (2*130) (2«115) (2x90-130) 1ц.

2 субъединицы ассоциирован Зц. (20,55,25) То же 2ц.(34,26) гл.,с. То же 1ц.,гл. 2ц.(37,26)

гл.,с. 2ц.(60,63)

1ц.,гл.,с.

1ц.,гл.,с. 1ц.,гл.,с.

5-5,5

6

8

7- 7,5

7.4- 7,8

8- 9 8-9

7,8-8 7,7 7,8

7.5- 8

7,8-8 4,5-5

7,5 5,5

5,5

4,8-5,7 4-6 4-5

4,4

6

5,5

5,5 4,3

Мембранный; yscV

SH-зависимый Мембранный

и II II

Растворимый Катепсин А

м

SH-зависимый SH-зависимый

SH-зависимый "Фасеолин

Карбоксипеп-тидаза Y,

[213] [2141 [2151 [216]

[217]

[218] [219,220]

[221 ] [222-224]

[225] [226,227,

22В] [229,230]

[231 ]

[232-2341 [235-237]

[235-2371 [238,239]

[238,240] [241] [242]

[243] [244] [245-247, 248] [247]

[249,250, 25) ]

2.3.Характеристика отдельных типов амидгидролаз

39

см со см m mm -iniri см см *-D см со

I . ¦—,

ts со с-,

Юг-- U)"4D>-^ C\l О C\l О CO

VD C\J VD C\J x- CM

m i m \_d ^

CM CM CM

CM r- CO c\J LT, CM CO СГ, CM CO

-IS ts N

C\l C\J C\J

CO

CO CJ CO

CO СГ, О CM

-t-co -

[— CO '"M x-

c-,—,-^cc

CO CM

CO CO CO CO

coco

CO CO

I

К

га a и

cd о

в и о га

к к и

о

ЕН

pea Н м

р

ен

в

о ен cd

р к и

К га в о св

3 3

р

ЕН Ч о Ч

чШ

1Л m LH

слетит. m CO [T- CO CO en CT\C0 cr, cr\ cc СГ.С0 СГ, CTi СГ, co

- • 1 1 C- 1 1 1 1 CO I 1 I I I 1 ' 1 1 ! сл m m m со m( m CO cc CO CO c- CO CO CO CO [-

c- с— C— c—

m 4

-—* ¦ ¦ Fh ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦

• LT, * m G G m ¦ - a a О G • ¦ ¦ О G • G

CO № a г- * * • Я ¦ ¦ ¦ а и

х- xco~-^ CO m "=r SJ а и а и я

* CO m CO

CO

CO

CO CO СП ^ m m

со со m о ГЛ C- о о о со о - »mvD . — CO '-cf

CO x- v ГЧ mo CM О IT, OJ mco т- CM CM CO CO систем

co x- CO CO CO «-

I

0) I 1

ю и

cb

и о ч

cb cb

к

X Fh

ф 4

I

0 0)

га X ев И

о ч

cb

¦ f

p.

to я

Eh

m s

з a -* о

— p

— Eh

б P, Ю CO

сЗ ra

К

в* га ..,оо«

Р И Ч СВ

К G 3 >. и

ю ч о о

s s ш ч к

В « го s ев я

fflS1 й Ч^Ю

к о о о иске

и ю

G о

5е * а

Е- Е-I О О

е

L 0. И : .. ц

CD >.

СВ

р.

Я га га Ен ЯЯКЕффЦдф

ЕнРЯРЕнО) «СВ

св О св

Си S.3

га е га

л to

б 0) ф

гО св

— о « @

с- е го ез

сь К га

^ щ ^ Гй

- О g

в Ч ho

р го ф ф

о ч S ч

О ф Ч 2

я № о

race

в

га

к

G

р о s

со га ч S

Ен

К

к о с р

о

га

I R

К ГО

S ч

и s

га Ен

го св

св

О 6н

cd Ен О Р G

со СМ г-

СГ, С5^ ^

СМ

Т1-

СО СП

m t-со О х- СО П^1Л

со СО со см со

со

со

d-co

смгп

СГ, о ^— см

гл mvD

С-СО СГ

^t-

Таблица 12 (продолжение)

3 4 5 6 7 8 9

Трипсин Поджелудочная железа человека 22,9 1ц.,с. 7-8 Две формы 1,11 [291,293]

То же быка 23,8 1ц.,с. 7-8 Са-зависимая [292,293,

294,295] [293, 296-298]

и свиньи 23,4 1ц.,с. 7-8 к овцы 25,5 1ц.,с. 7-8 Са-зависимая [298]

н мыши 26,2 1ц.,с. 7-8 [299]

и крысы 30 1ц.,с. 7-8 Катионный и 1300,301,

анионный 302)

и индейки 18,6 1ц.,с. 7-8 [279]

и акулы 21 1ц.,с. 7-8 [303,304]

к трески Беспозвоночные: 24,2 1ц.,с. 7-8 3 формы [305]

и морской еж 29 1ц. 8 pi 5 [306]

и асцидия 27 Щ. 8,5-9 "Спермозин" [307]

н морская звезда 23,6 Щ. 8-8,5 2 формы А,В [308]

и Речной рак Astacus pluviatills Еасекожые: 25 1ц.,с. 8 [309, зю]

н шершень Vespa orientalI a 17 1ц.,с. 7-8 [284,3111

н бабочка Pleris brass ica 32 Щ. 7-8 [284]

и пчела Apis mellifera 20 Ш. 7-8 [284]

и саранча Lacusta 17 Щ. 7-8 [284]

migratoria [284]

п табачный червь Manduca 24 Щ. 7-8

soxta [312]

шелкопряд Bomrlx mori 28 1ц.,гл., 7-8 "Коконаза" Тромбин Плазма крови человека 40 2ц.,гл.,с. 7-8 [313,374--376]

н быка 39 2ц.(32;5,7) гл.,с. 7-8 3 формы [313,3)7--319]

и свиньи 40 2ц.,гл.,с. 7-8 [317]

Фактор коагуляции Ха Плазма крови 59 2ц. (42,17) 7-8 Фактор [320-322,

человека гл.,с. 2ц. (39,17) гл. с. Стюарта 323]

То же быка 56 [322]

Плазмин Плазма крови человека 76 2ц.(26,49) с. 7-8 [324,325--327]

и быка и др. «80 2ц.,с. 7-8 [326,328]

51

52

53

54

55

56 57 58

59 60 61

62

63

64

65 66

67

68 69

70

71

72

73 74 75

3.4.21.4.

3.4-21.5

3.4.21.6

3.4.21.7

76 77

78

79

80

81 82 83

84

85 86

87 88 89

90 91 92

93

94 95

96 97

98 99

100

101

3.4.21 .9

3.4.21 .10

4.21 .12 4.21 .-4.21 .14

Энтеропептида з а

Акрозин

а-Литическая протеиназа Литическая протеиназа Микробные сериновые протеиназы

Субтилизин Карлсберг

Субтилизин Е Субтилизин BPN'

Субтилизин DY Протеиназа Внутриклеточная протеиназа Протеаза I " II IV

VI

" VII So

" Re

Mi Pa

Щелочные протеиназы А

То же В

12-перстная кишка человека быка

свиньи Сперма человека и др.

медведя

асцидии Lyaobacter enzymogenus Вас(Пиэ sub i 111 з

ВасtZJus I tcb.entforw.ia

Bacillus subtilia ВасiIXua

amilaliquefaciens

Bacillus gubtilis DY To же W

Bsch.ertch.ta coif To же

Baetllus mesenterteus Aspergillus oryzae

ОКОЛО Зц.,гл. 8-9 Энтерокиназа I329]

300

150 2ц. (115,35) 8,4 [330,331 ]

гл.

190 2ц.,гл. [332]

38 1ц.,гл.,с. 8-8,2 Активиро- [333-335]

ванный Са

41 2ц.(37;4,2) 8,5-9 [336]

гл.,с .

32-34 гл. 8,5 [307]

19,7 1ц.,с. 8 [337,338]

28 1Ц. 7,8-8,5 [339]

26,3 1ц.,с. 10-11 Субтилопеп- 1340-343]

тидаза А

27,7 1ц.,с. 8-10 [344,345]

27,5 1ц.,с. 8,5-9,5 Субтилопеп- [342,343,

тидаза С, 346-348]

нагарсе [349]

27,5 1ц.,с. 7-9 28,8 (2x14) 7-9 [350 J

30 1ц.,с.,диме- 7-9 Са-зависимая [351,352]

ризованная

21 1Ц. 7-9 Периплазма [353,354]

58 1ц.,гл. 7-9 Цитоплазма [355,356]

34 1ц.,с. 7,5 Сигнальная, [357,358,

(67) (тетрамер) Наружная, 359]

мембранная

Ассоцииро- 7-7,2 Трансмемб- [360]

ванная с SDS ранная

43 7,8 Мембранная [359]

180 в SDS,с. 6 Продукт [36Т ]

отрИ гена

140 (2x70) 6,5 Цитоплазма [362,363]

82 Щ. 8 Периплазма и [362]

цитоплазма [362]

110 Периплазма 110 Цитоплазма [362]

24 1ц.,с. 7-9 Мезентерико- [364 ]

пептидаза [365,366]

17,7 1Ц.,гл. 10,5 Аспергилло- Таблица 12 (продолжение)

1 2 3 4 5 6 7 8 9

Пептидаза Б

102 " С То же 19,6 1ц.,гл. 10,5 То же С [365]

103 к Aspergillus flavus 18 Ш. 7-10 [365,367]

104 м Протеиназы комплекса " eajae Streptomyces griseus 25,7 Щ. 7-10 ГЗЬ5,ЗЬЬ]

"проназа" [368,369, 370]

105 То же А To же 18 1ц.,с. 8-10 106 Б к 20 1ц.,с. 8-10 [368,369, 371 ]

107 " С к 16-18 Щ. 8-10 [368,369]

108 D и 27 Щ. 8-10 [372]

109 " Е и 27 Щ. 8-10 [372]

110 Внеклеточная протеиназа А Streptomyces rutgersensis 20 1ц.,с. 9-10 [373]

111 То же D To же 28 Щ. 8-10 Na-зависимая [374]

2 формы [375]

112 Протеиназа SSPB Streptomyces epheroides 28 10-11 Фибринолити-ческая 113 Протеиназа Arthrobacter sp. 23 Ш. 6-9 1376,377]

114 К TrltIrachlum album 29 1ц.,с. 8 [378,379, 380]

115 Термомиколин Гриб Mai branched, 33 1ц.,с. 8,5 Са-зависимая [381]

pulchella [382]

116 Термостабильная протеиназа Thermomonospora 14,5 9 t„„m 80°0 опт 117 То же Thermus caldophilus 75 гл. 7,2-7,8 При денату- [3831

рации 7 форм (Мг 31-62)

118 Аквализин I Thermus aquaticus 28,5 Щ. 10 Эластазопо- [384,385,

добная 386]

119 Бациллопептидаза Р Bacillus subtil is 33,5 1ц.,гл.,с. 7,5-8 2 формы [387]

(автолиз) [388]

120 Протеиназа Flavobacterium arbcrescens 19 8-10,5 121 Кутикуло-деградирующая [389]

протеиназа Рг-1 Metarhizium anisopllae 25 1Ц. Химоэластаза 122 То же Рг-2 To же 28,5 1Ц. Трипсино- [389]

подобная [390]

123 Протеиназа Trichophyton rubruro 90 (2*44) 8 Активируемая Са 124 " архебактерий Besulfurococcus sp. 52 М 13 (метод Сохраняет 1391 ]

ггельфильт- активность

125 " цианобактерий рации) при 125°С!

Anabena variabilis 52 Са-зависимая [392]

126 м Laotococcus lactls 135 1ц.,с. В оболочке [393]

клеток

127 Термитаза ThermoactInomyces 35 1ц.,с. 8-9 Ингибируется [394,395,

.16 vulgaris Щ 396]

128 3.4.21 Протеиназа Alternarla fenusslma 24 Щ. 8-10 [397]

129 3.4.21 .18 II л, Хрущак мучной Tenebrla 24 1ц. 7-8 [398]

mo 11 tor

130 В To же 60 7-8 1398]

131 и ЛИЧИНКИ Sypoderma 27 1ц.,с. 7-8,5 Гиподермин А [399]

IIneatvm

132 м To же 23 1ц.,с. 8-10 Гштодермин В [400]

133 3.4.21 .19 Стафилококковая Btaphyllococcus 29 1ц.,с. 7,7 Glu-специфи- [ 401 ,402 ,

сериновая протеиназа в aureus , V8 ческая 403,404]

134 То же а To же 8325 N 12 1ц. 4 и 7,8 Продукт ав- [401,405]

толиза "в" ?

135 Glu, A sp-специфичная Streptomyces grlseus 20 1ц. 8,8 [406]

136 протеиназа

То же Streptomyces 25 1ц.,с. 8,5 [407,408]

therovulgarls

137 Протеиназа I Acremonlum chrysogenum 28 1Ц.,С. 10-11 ,5 Ингибируется Не [409]

138 Протеиназа Подсолнечник 25 Щ. 7,8 То же [410]

139 3.4.21 .20 Катепсин G Гранулоциты человека 28 1ц.,С. 7-8 [411,412]

140 То же Лейкоциты животных 28 1ц. 7,5 [413,414]

141 и Нейтрофилы свиньи 28-29 1ц. 8-8,5 [415]

142 3.4.21 .21 Фактор коагуляции Vila Плазма крови быка 53 2ц.(24,29) [416,417,

гл.,с. 418]

143 3.4.21 .22 То же 1Ха Плазма крови человека 44 2ц. (27,17) 7,5 Кристмас [323,419,

гл.,с. фактор 420]

144 3.4.21 .- " Va То же 170 2ц.(94,74) 8 Субъединицы